NHUỘM
GRAM
BỆNH
PHẨM
NHUỘM GRAM
NI CẤY,
PHÂN LẬP
PHẢN ỨNG SINH
HĨA ĐỊNH DANH
KHÁNG SINH
ĐỒ
1. Biết cách cấy vi khuẩn vào môi trường chẩn đốn
sinh hóa
2. Biết cách định danh cầu khuẩn gram (+), cầu
khuẩn gram (-)
Các thử nghiệm đánh giá các hoạt động chuyển hóa
và sinh học của vi khuẩn mà qua đó định danh được
lồi vi khuẩn.
•Từ mơi trường phân lập, chọn
khúm khuẩn cần định danh cấy vào
các mơi trường chẩn đốn sinh hóa.
•Mỗi lồi vi khuẩn có các phản ứng
sinh hóa định danh khác nhau.
1. Môi trường đặc:
Môi trường thạch nghiêng:
Dùng que cấy khuyên
tròn cấy zig-zag lên
mặt nghiêng của
thạch
Mt Simmon citrate
MT Chapman
Môi trường thạch sâu:
Dùng que cấy thẳng đâm
thẳng đứng theo chiều sâu
của thạch
MT mannitol
Môi trường thạch nghiêng - sâu
Phần nghiêng: dùng que
cấy khuyên tròn cấy zigzag lên mặt nghiêng
của thạch
Phần sâu: dùng que cấy
thẳng cấy thẳng xuống theo
chiều sâu của thạch
MT KIA
2. Mơi trường lỏng:
Dùng que cấy khun
trịn lấy khúm khuẩn,
hịa vào ống môi
trường
MT urê MT pepton MT lysin
(Indol)
CẦU KHUẨN
Gram (+)
Gram (-)
Staphylococci
N. menigitisdis
Streptococci
N. gonorrhoeae
Staphylococci
NHUỘM
GRAM
BỆNH
PHẨM
Mủ, máu,
đàm, dịch
não tủy…
NI CẤY,
PHÂN LẬP
NHUỘM
GRAM
PHẢN ỨNG SINH
HĨA ĐỊNH DANH
Tiêu huyết
Catalase
Coagulase
Chapman
Thử nghiệm Catalase:
Hydrogen peroxide (H2O2)
CATALASE
H2O + O2
Phân biệt Staphylococci và các cầu khuẩn gram (+)
khác
Catalase (+) (hiện tượng sủi bọt khí): Staphylococci
Catalase (-): cầu khuẩn gram (+) khác
Thử nghiệm
Catalase
VK
se
a
al
t
Ca
Ca
t
H2O2 3%
)
(+
al
as
e
(-
)
Staphylococci
Các loại cầu
khuẩn gram (+)
khác
Catalase (+)
Khảo sát sự
tiêu huyết
Coagulase
Chapman
2. Khảo sát sự tiêu huyết
Tiêu huyết β
Không tiêu
huyết
Thử nghiệm Coagulase:
Coagulase (+): làm đông huyết tương
Coagulase (-): không làm đông huyết tương
Thử nghiệm Coagulase
VK
Coagulase (+)
Coagulase (-)
4. Mơi trường chapman:
Mơi trường có 7,5% NaCl
mannitol
Chất chỉ thị màu phenol red
và
Chapman (+)
Chapman (-)
• Chapman (+)
• Chapman (-)
có VK mọc và mơi trường
có VK mọc, mơi trường
chuyển từ đỏ sang vàng
khơng đổi màu
BẢNG ĐỊNH DANH STAPYLOCOCCI
Chapma
Coagulas
n
e
S.aureus
+
+
S.intermedius
V
S.epidermidis
Ure
Polymyci
Novobioci
n
n
V
R
S
+
+
S
S
-
-
V
R
S
S. haemolyticus
V
-
-
S
S
S. lugdunesis
-
-
V
V
S
Streptococci
NHUỘM
GRAM
BỆNH
PHẨM
Mủ, máu,
đàm, dịch
não tủy…
NHUỘM
GRAM
NI CẤY,
PHÂN LẬP
PHẢN ỨNG SINH
HĨA ĐỊNH DANH
-Khảo sát tiêu
huyết
-Taxo A
-CAMP test
-Taxo P
-Thử nghiệm ASO
1.
Khảo sát sự tiêu huyết
•Tiêu huyết β (tiêu huyết hồn
tồn) tạo vòng tiêu huyết sáng,
trong bao quanh khúm khuẩn trên
thạch máu
•Tiêu huyết α (tiêu huyết khơng
hồn tồn): hồng cầu bị ly giải
khơng hồn tồn, tạo nên vịng
tiêu huyết mờ, hơi ánh lên màu
xanh.
•Tiêu huyết ϒ: hồng cầu khơng
bị ly giải nên khơng tạo ra vịng
tiêu huyết
TIÊU HUYẾT β
TIÊU HUYẾT α
TIÊU HUYẾT ϒ
TIÊU HUYẾT
β
TAXO A
Streptococcus nhóm A
(S. pyogenes)
THỬ NGHIỆM
CAMP
Streptococcus nhóm B
(S. agalactiae)