Tải bản đầy đủ (.ppt) (43 trang)

ĐỊNH DANH cầu KHUẨN (THỰC HÀNH VI SINH)

Bạn đang xem bản rút gọn của tài liệu. Xem và tải ngay bản đầy đủ của tài liệu tại đây (2.48 MB, 43 trang )


NHUỘM
GRAM
BỆNH
PHẨM

NHUỘM GRAM
NI CẤY,
PHÂN LẬP
PHẢN ỨNG SINH
HĨA ĐỊNH DANH

KHÁNG SINH
ĐỒ


1. Biết cách cấy vi khuẩn vào môi trường chẩn đốn
sinh hóa
2. Biết cách định danh cầu khuẩn gram (+), cầu
khuẩn gram (-)




Các thử nghiệm đánh giá các hoạt động chuyển hóa
và sinh học của vi khuẩn mà qua đó định danh được
lồi vi khuẩn.

•Từ mơi trường phân lập, chọn
khúm khuẩn cần định danh cấy vào
các mơi trường chẩn đốn sinh hóa.


•Mỗi lồi vi khuẩn có các phản ứng
sinh hóa định danh khác nhau.


1. Môi trường đặc:
 Môi trường thạch nghiêng:

Dùng que cấy khuyên
tròn cấy zig-zag lên
mặt nghiêng của
thạch

Mt Simmon citrate

MT Chapman


 Môi trường thạch sâu:

Dùng que cấy thẳng đâm
thẳng đứng theo chiều sâu
của thạch

MT mannitol


 Môi trường thạch nghiêng - sâu
Phần nghiêng: dùng que
cấy khuyên tròn cấy zigzag lên mặt nghiêng
của thạch

Phần sâu: dùng que cấy
thẳng cấy thẳng xuống theo
chiều sâu của thạch

MT KIA


2. Mơi trường lỏng:

Dùng que cấy khun
trịn lấy khúm khuẩn,
hịa vào ống môi
trường

MT urê MT pepton MT lysin
(Indol)


CẦU KHUẨN
Gram (+)

Gram (-)

Staphylococci

N. menigitisdis

Streptococci

N. gonorrhoeae




Staphylococci
NHUỘM
GRAM
BỆNH
PHẨM

Mủ, máu,
đàm, dịch
não tủy…

NI CẤY,
PHÂN LẬP

NHUỘM
GRAM

PHẢN ỨNG SINH
HĨA ĐỊNH DANH

 Tiêu huyết
 Catalase
 Coagulase
 Chapman


Thử nghiệm Catalase:
Hydrogen peroxide (H2O2)



CATALASE

H2O + O2

Phân biệt Staphylococci và các cầu khuẩn gram (+)
khác
Catalase (+) (hiện tượng sủi bọt khí): Staphylococci
Catalase (-): cầu khuẩn gram (+) khác


Thử nghiệm
Catalase
VK
se
a
al
t
Ca
Ca
t

H2O2 3%

)
(+

al
as

e

(-

)

Staphylococci

Các loại cầu
khuẩn gram (+)
khác


Catalase (+)

Khảo sát sự
tiêu huyết

Coagulase

Chapman


2. Khảo sát sự tiêu huyết

Tiêu huyết β

Không tiêu
huyết



Thử nghiệm Coagulase:
Coagulase (+): làm đông huyết tương
Coagulase (-): không làm đông huyết tương


Thử nghiệm Coagulase

VK

Coagulase (+)

Coagulase (-)


4. Mơi trường chapman:




Mơi trường có 7,5% NaCl
mannitol
Chất chỉ thị màu phenol red




Chapman (+)

Chapman (-)


• Chapman (+)

• Chapman (-)

có VK mọc và mơi trường

có VK mọc, mơi trường

chuyển từ đỏ sang vàng

khơng đổi màu


BẢNG ĐỊNH DANH STAPYLOCOCCI

Chapma

Coagulas

n

e

S.aureus

+

+


S.intermedius

V

S.epidermidis

Ure

Polymyci

Novobioci

n

n

V

R

S

+

+

S

S


-

-

V

R

S

S. haemolyticus

V

-

-

S

S

S. lugdunesis

-

-

V


V

S



Streptococci
NHUỘM
GRAM
BỆNH
PHẨM

Mủ, máu,
đàm, dịch
não tủy…

NHUỘM
GRAM
NI CẤY,
PHÂN LẬP

PHẢN ỨNG SINH
HĨA ĐỊNH DANH

-Khảo sát tiêu
huyết
-Taxo A
-CAMP test
-Taxo P
-Thử nghiệm ASO



1.

Khảo sát sự tiêu huyết
•Tiêu huyết β (tiêu huyết hồn
tồn) tạo vòng tiêu huyết sáng,
trong bao quanh khúm khuẩn trên
thạch máu
•Tiêu huyết α (tiêu huyết khơng
hồn tồn): hồng cầu bị ly giải
khơng hồn tồn, tạo nên vịng
tiêu huyết mờ, hơi ánh lên màu
xanh.
•Tiêu huyết ϒ: hồng cầu khơng
bị ly giải nên khơng tạo ra vịng
tiêu huyết


TIÊU HUYẾT β
TIÊU HUYẾT α

TIÊU HUYẾT ϒ


TIÊU HUYẾT
β

TAXO A


Streptococcus nhóm A
(S. pyogenes)

THỬ NGHIỆM
CAMP

Streptococcus nhóm B
(S. agalactiae)


×