<span class='text_page_counter'>(1)</span><div class='page_container' data-page=1>

<i>Pham Trung Kien, Huynh Dai Phu, Nguyen Van Tam, Ngo Vo Ke Thanh, … </i>

8. Pham Trung Kien. - Ability to use wasted cullet in glass industry as
environmental-friendly materials for sustainable development. RCME 29-30 Oct 2015, Bangkok,
section 1C-3, pp. 1.

<b>TÓM TẮT </b>

TỔNG HỢP KHOÁNG CALCIUM SILICATE HYDRATE (CSH)
TỪ NGUỒN NGUYÊN LIỆU TRẤU

Pham Trung Kien1*_{, Phan Viet Hoang}1_{, Huynh Dai Phu}1_{, Nguyen Van Tam}2_,
Ngo Vo Ke Thanh2_{, Nguyen Hoc Thang}3_{, Hirofumi Hinode}4

<i>1_{Đại học Bách Khoa TP.HCM,}</i>
<i>2_{Trung tâm Nghiên cứu triển khai - Khu Công nghệ cao TP.HCM,}</i>

<i>3_{Đại học Công nghiệp Thực phẩm TP.HCM,}</i>
<i>4_{Viện Công nghệ Tokyo.}</i>
*<i>_Email:</i>

Việt Nam là nước nông nghiệp, sản xuất nhiều gạo và sản phẩm phụ là trấu. Trấu được
xem là chất thải nông nghiệp và được đốt bỏ. Q trình này gây ơ nhiễm môi trường, thu hút
nhiều nghiên cứu để tận dụng trấu. Nhóm nghiên cứu ở bộ mơn Ceramic tận dụng trấu như
nguồn cung cấp silica (SiO2). Cần nhấn mạnh rằng thành phần chính của trấu là silica.
Nghiên cứu này công bố kỹ thuật mới phối trộn tro và CaO với tỷ lệ mol Ca/Si 1.0 để tổng
hợp khống xonotlite như vật liệu mơi trường. Ưu điểm của nghiên cứu này là tận dụng
nguồn trấu Việt Nam và giảm tác hại lên môi trường bằng phản ứng thủy nhiệt.

<i>Từ khóa: Calcium silicate, trấu, thủy nhiệt, ceramic. </i>

<i>Tạp chí Khoa học công nghệ và Thực phẩm <b>12 (1) (2017) 73-80</b></i>

<b>XÁC ĐỊNH SALBUTAMOL TRONG</b>

<b>MẪU THỊT BẰNG</b>

<b>PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ KHÍ GHÉP KHỐI PHỔ</b>

<b>(GC/MS)</b>

<b>Trần Nguyễn An Sa*,</b>

<b>Nguyễn Trang Vi Hậu</b>

<i>TrườngĐại học Công nghiệp Thực phẩmTP.HCM</i>
*Email:<i></i>

Ngày nhận bài: 29/6/2017;Ngày chấp nhận đăng:18/9/2017

<b>TÓM TẮT</b>

Nội dung nghiên cứu của báo cáo là khảo sát các điều kiện tối ưu trong qui trình xác

định salbutamol trong mẫu thịt bằng phương pháp GC/MS với hệ thống thiết bị Agilent
7890N, đầu dò MSD 5975C, cột mao quản khảo sátlà HP – 5MS. Các điều kiện khảo sát
bao gồm: khảo sát các thông số của hệthống GC/MS; xây dựng đường chuẩn và khảo sát
LOD, LOQ dựa vào đường chuẩn; LOD, LOQ của mẫu,khảo sát hiệu suất thu hồi của quy
trình.Kết quảkhảo sát thu được qui trình phân tích với chếđộqt phổ: SIM; chương trình
nhiệt: 120o_{C giữ}_0,1_{phút, tăng 15}o_{C/phút đến 245} o_{C, tăng 30}o_{C/phút đến 300}o_{C giữ}₁₀
phút; chế độtiêm mẫu: Splitless; LOD = 0,12 ppb, LOQ = 0,41ppb, khoảng tuyến tính từ
10ppb–200ppb, LOD và LOQ trên nền mẫu lần lượt là: 0,018ppb và 0,049ppb.

<i>Từ khóa:</i>Salbutamol,salbutamol–d3,GC/MS, mẫu thịt, SIM.

<b>1.</b> <b>MỞĐẦU</b>

Chất tăng trọng hay chất tạo nạclà một hợp chất hóa học thuộc họβ–agonist được xếp

vào loại chất cấm sửdụng trong chăn nuôi trên tồn thế giới. Họβ – agonist, điển hình là
salbutamol,là các hợp chất tổng hợp phenethanolamine. Trong y học, salbutamol được sử
dụng như là một tác nhândùng điều trịcác bệnh vềhô hấp,được dùng cho người với tên biệt
dược là albuterol, salbutamol [1], Trong chăn nuôi, dược liệu này được đưa vào trong thức
ăn gia súc nhằm giảm lớp mỡ dưới da, tăng cơ, tăng trọng đối với vật nuôi. Theo nhiều
nghiên cứu,salbutamol gây hại cho gia súc và cảngười nếu ăn phải thịtvật nicó sửdụng
cácloại thức ăn có trộnsalbutamol, vì nó là chất kích thích mạnh, làm suy nhược chức năng
gan[2].

Từlâu, salbutamol đã là chất bịcấm sử dụng trong chăn nuôi theo quyết định của Tổ
chức Y tế thế giới, Tổ chức lương thực và nông nghiệp của Liên hợp quốc. Vào tháng

7/1997, Châu Âu đã cấm sửdụngβ–agonist(ngoại trừdùng làm thuốc thú y).ỞViệt Nam,
các loại dược liệu thuộc nhómβ–agonisttrong đó có salbutamol được xếp vào danh mục 18
hóa chất bịcấm của Bộ nông nghiệp và phát triển nông thôn. Tuy nhiên, các chất này vẫn
còn bịmột bộphận người dân sửdụng trong chăn ni, do đó,ngay sau khi có thơng tin về
việc ngun liệu salbutamol cókhảnăng bị sửdụng sai mục đích trong chăn ni, Bộ Y tế
đã tích cực thực hiện các biện pháp để ngăn chặn việc lạm dụng, sử dụng sai mục đích
nguyên liệu làm thuốc, đặc biệt là với trường hợp của salbutamol. Cụcquản lýdược đã có
Cơng văn số21590/QLD-KD ngày 20/11/2015 thông báo đến các cơ sởnhập khẩu, các SởY
tế, Tổng cục hải quan vềviệc tạm ngừng nhập khẩu nguyên liệu salbutamol[3-5].

</div>
<span class='text_page_counter'>(2)</span><div class='page_container' data-page=2>

<i> </i>

Trong thời gian qua, trên thếgiới vàởViệt Nam cũng đã có một sốbáo cáo vềcác phương
pháp phân tíchsalbutalmoltrên những đối tượng mẫu kiểm nghiệm khác nhau nhằm xác định tồn
dư thuốc, đánh giá hiệu quảcủa việc sửdụng thuốc trong chăn ni,liều an tồn đốivới gia súc,
gia cầm và con người[6].Các phương pháp phân tích sửdụng bao gồm định tính bằngkỹthuật
ELISA trong mẫu thức ăn chăn nuôi[7],định lượng bằng phương pháp GC/MStrong mẫu thịt,
thức ăn chăn nuôivới chất nội chuẩn17-ethyltesttosterone[8-10]; phương pháp HPLC/MS xác
địnhsalbutamol trong mẫu thức ăn gia súc và dư lượng trong thịt[2, 11],nước tiểu[12],trong
mẫu sữa[13].Đối với phương pháp GC/MS sửdụng nội chuẩn salbutamol–d3cũng đã có nhiều
nghiên cứu đềcập[14-16]nhưngtập trung nhiều vào salbutamol trong các mẫu đơn giản như
mẫu thức ăn gia súc,mẫu nước tiểu của gia súc, riêng đối với mẫu thịt, qui trình phân tích vẫn

chưa tối ưu các điều kiệnphân tích trên thiết bịAgilent 7890Nvà thẩm địnhphương pháp[17].

<b>2.</b> <b>NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU</b>

<b>2.1</b> <b>Nguyên liệu</b>
<i>2.1.1Thiết bị</i>

Máysắc kýAgilent 7890A với đầu dị MSD 5975C, khí mang heli,cộtHP–5MSAgilent,
thành phần pha tĩnh 5% phenyl–95% dimethylpolysiloxane (30m×0,25mm×0,25m).
<i>2.1.2Hóa chất</i>

Hóa chất sử dụng cho nghiên cứu này là loại tinh khiết dành cho phân tích GC:

Methanol HPLC(Merck,grade ≥ 99,8%); Acetonitril HPCL(Merck,grade ≥ 99,8%); Ethyl
acetate (Merck,99,5%); Sabutamol.HCl (Dr.Ehrensofer, ≥ 98% GC); Salbutamol – d3.HCl
(Dr.Ehrensofer, ≥ 98% GC); BSTFA (1% TMCS) (Dr.Ehrensofer, ≥ 98% GC); Amonium
hydroxide(Merck,25%); Natri acetat(Merck,99,5%);Acid acetic(Merck,99,8%).

<b>2.2</b> <b>Phương pháp</b>

<i>2.2.1Chuẩn bịdung dịch chuẩnvà mẫu</i>

<i> Dung dịch </i>chuẩn dùng làm khảo sát các thông số: từdungdịchchuẩnsalbutamol
1000 ppm, pha thành 100µLdung dịch chuẩn salbutamol 1 ppm, thêm 100µLnộichuẩn
salbutamol d3, 1mLmethanol,vào vial 1,5mL.

Đối với mẫu: cân10 gmẫuthịt, chiết với methanoltrong mơi trường đệm acetat(pH5,2),
lắc voltex, lytâm2500 vịng/phútở20o_C_{trong 15 phút, làm sạch bằng cách cho qua cột PCX,}
dung dịch rửa giải etylacetat/acetonitril/ammonium hydroxide (90:10:5). Thổi khơ dung dịch
chiết bằng khí nitơ ở40 o_C,_hòa_tan_bằng₁ _mL_methanol,_chuyển_hết_vào_vial_1,5 _mL,_thêm

100µLnội chuẩn salbutamol d3.

<i>2.2.2Khảo sát các thông sốcủa hệthống GC/MS</i>

Để khảo sát các thông số của hệthống,tạo dẫn xuấtsalbutamol và salbutamol d3 với
BSTFA:TMCS (99:1)trong môi trường đệm acetat, chiết dẫn xuất này và tiến hành chạy sắc
ký vớicácchương trìnhnhiệt và chếđộchia dịng khác nhau.

<i>2.2.3 Xây dựng đường chuẩn và khảo sát LOD, LOQ dựa vào đường chuẩn</i>

</div>
<span class='text_page_counter'>(3)</span><div class='page_container' data-page=3>

Trong thời gian qua, trên thế giới và ở Việt Nam cũng đã có một số báo cáo về các phương
pháp phân tích salbutalmol trên những đối tượng mẫu kiểm nghiệm khác nhau nhằm xác định tồn
dư thuốc, đánh giá hiệu quả của việc sử dụng thuốc trong chăn nuôi, liều an toàn đối với gia súc,
gia cầm và con người [6]. Các phương pháp phân tích sử dụng bao gồm định tính bằng kỹ thuật
ELISA trong mẫu thức ăn chăn nuôi [7]; định lượng bằng phương pháp GC/MS trong mẫu thịt,
thức ăn chăn nuôi với chất nội chuẩn 17-ethyltesttosterone [8-10]; phương pháp HPLC/MS xác
định salbutamol trong mẫu thức ăn gia súc và dư lượng trong thịt [11, 2], nước tiểu [12], trong
mẫu sữa [13]. Đối với phương pháp GC/MS sử dụng nội chuẩn salbutamol – d3 cũng đã có nhiều
nghiên cứu đề cập [14-16] nhưng tập trung nhiều vào salbutamol trong các mẫu đơn giản như
mẫu thức ăn gia súc, mẫu nước tiểu của gia súc, riêng đối với mẫu thịt, qui trình phân tích vẫn
chưa tối ưu các điều kiện phân tích trên thiết bị Agilent 7890N và thẩm định phương pháp [17].

<b>2. NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU </b>
<b>2.1 Nguyên liệu </b>

<i>2.1.1 Thiết bị </i>

Máy sắc ký Agilent 7890A với đầu dị MSD 5975C, khí mang heli, cột HP – 5MS Agilent,
thành phần pha tĩnh 5% phenyl – 95% dimethylpolysiloxane (30 m × 0,25 mm × 0,25 m).
<i>2.1.2 Hóa chất </i>

Hóa chất sử dụng cho nghiên cứu này là loại tinh khiết dành cho phân tích GC:
Methanol HPLC (Merck, grade ≥ 99,8%); Acetonitril HPCL (Merck, grade ≥ 99,8%); Ethyl
acetate (Merck, 99,5%); Sabutamol.HCl (Dr.Ehrensofer, ≥ 98% GC); Salbutamol – d3.HCl
(Dr.Ehrensofer, ≥ 98% GC); BSTFA (1% TMCS) (Dr.Ehrensofer, ≥ 98% GC); Amonium
hydroxide (Merck, 25%); Natri acetat (Merck, 99,5%); Acid acetic (Merck, 99,8%).

<b>2.2 Phương pháp </b>

<i>2.2.1 Chuẩn bị dung dịch chuẩn và mẫu </i>

Dung dịch chuẩn làm việc dùng khảo sát các thông số: từ dung dịch chuẩn salbutamol
1000 ppm, chúng tơi pha thành 100 µL dung dịch chuẩn làm việc salbutamol 1 ppm, thêm
100 µL nội chuẩn salbutamol d3, 1 mL methanol, vào vial 1,5 mL.

Đối với mẫu: cân 10g mẫu thịt, chiết với methanol trong môi trường đệm acetat (pH = 5,2),
đánh votex, ly tâm 2500 vòng/phút ở 20 o_{C trong 15 phút, làm sạch bằng cách cho qua cột PCX,}
dung dịch rửa giải etylacetat/acetonitril/ammonium hydroxide (90:10:5). Thổi khô dung dịch
chiết bằng khí nitơ ở 40 o_{C, hịa tan bằng 1 mL methanol, chuyển hết vào vial 1,5 mL, thêm}
100 µL nội chuẩn salbutamol d3.

<i>2.2.2 Khảo sát các thông số của hệ thống GC/MS </i>

Để khảo sát các thông số của hệ thống, tạo dẫn xuất salbutamol và salbutamol d3 với
BSTFA:TMCS (99:1) trong môi trường đệm acetat, chiết dẫn xuất này và tiến hành chạy sắc
ký với các chương trình nhiệt và chế độ chia dòng khác nhau.

<i>2.2.3 Xây dựng đường chuẩn và khảo sát LOD, LOQ dựa vào đường chuẩn </i>

Do điều kiện thí nghiệm hạn chế (dẫn xuất đồng vị d3 có giá thành cao) nên đường

chuẩn được bắt đầu từ nồng độ salbutamol là 10 ppb. Bên cạnh đó, salbutamol là chất cấm,
khơng được có trong thực phẩm theo tiêu chuẩn Việt Nam nên để đánh giá khoảng tuyến tính
và xây dựng đường chuẩn cần khảo sát với khoảng nồng độ salbutamol  200 ppb.

<i>2.2.4 Khảo sát hiệu suất thu hồi của quitrình và phân tích mẫu</i>

Dung dịch chuẩn 100 ppb(pha từdung dịch salbutamol 1000ppm) được dùng đểđánh

giá độ chính xác của đường chuẩn và hiệu suất thu hồi củaphương pháp. Đểđánh giá hiệu
suất thu hồi qui trình: cân 10g mẫu thịt, thêm 0,1 mLdung dịch chuẩnsalbutamol 100ppb
và 0,1 mL dung dịch nội chuẩn salbutamol d3 100ppb. Chiết salbutamol trong mẫu thêm
chuẩn và không thêm chuẩn với dung môi methanol trong mơi trường đệm acetat. Cơ khơ
mẫu dưới dịng khí nitơ, thêm thuốc thử(BSTFA:TMCS) tạo dẫn xuất vớisalbutamol và nội
chuẩn salbutamol d3. Tiêm mẫu vào máy sắc ký với thểtích mẫu là 1L.

<b>3.</b> <b>KẾT QUẢVÀ BÀN LUẬN</b>

<b>3.1. Kết quảkhảo sát các thông sốcủa hệthống GC/MS</b>

Dosalbutamolvà clenbuterol cùng thuộc họβ–agonic, nên thường xác định đồng thời
salbutamol và clenbuterol trong cùng điều kiện. Kết quả sắc ký đồ thể hiện ở Hình 1 cho thấy
khi sử dụng chương trình 1 (100 ºC giữ 1,5 phút, tăng 10 ºC /phút đến 280 ºC, tăng
5ºC/phút đến 300ºC)cácpeak của dẫn xuấtclenbuterol, clenbuterol d9với thuốc thử tách
khỏipeak của dẫnxuất giữa salbutamol, salbutamol d3nhưng dẫn xuất của salbutamol khơng
tách hồn tồn khỏi salbutamol d3, với thời gian lưu (tR) của clenbuterol, clenbuterol d9,

salbutamol, salbutamol d3lần lượt là 8,332; 8,272và 8,505; 8,512.

<i>Hình1.</i>Sắc ký đồxác định salbutamol với chương trình nhiệt 1

Kết quả sắc ký đồthu được (Hình2) khithay đổi chương trình nhiệt của hệthống vàtiến
hành chạy sắc ký với chương trìnhnhiệt 2 như sau: 120ºCgiữ0,1phút, tăng 15ºC/phút đến
245 ºC, tăng 30 ºC/phút đến 300 ºC giữ 10 phút, cho thấy 2 peak của dẫn xuất giữa salbutamol,
salbutamol d3với thuốc thửvẫn không tách khỏi nhau.So với chương trình 1, chương trình 2
có hiệu suất tách tương đương nhưng với thời gian tách ngắn hơn.

Kết quảkhảo sátởcả2 chương trình 1 và 2:peak của dẫn xuất giữa chuẩn salbutamol, và

</div>
<span class='text_page_counter'>(4)</span><div class='page_container' data-page=4>

<i>Hình2.</i>Sắc ký đồxác định salbutamol với chương trình nhiệt 2

Kết quảkhảo sát thểhiệnởHình3cho thấy có4mảnh ionchính là73, 86,369 và 372.
Khiso sánh với thư viện NIST,các mảnhm/z =73và86củasalbutamolvàsalbutamol d3là
trùng nhau, các mảnh m/z = 369 của salbutamol và 372 salbutamol d3 là tách biệt rõ rệt (Hình3
và 4). Do đó chúng tơi chọn mảnh m/z =369 là mảnh ion định lượng của salbutamol,và
mảnh ion 372là mảnh ion định lượng cho salbutamol d3theo chương trình 2 ởchếđộSIM.
So sánh tài liệutham khảo [14, 15], chươngtrình nhiệt được lựa chọn cóhiệu quảsắc ký
tương đương nhưng thời gian tách ngắn hơn, do đó tiết kiệm được thời gian và hóa chất.

<i>Hình 3. Khối phổ đồ chuẩn salbutamol và salbutamol d</i>3

<i>Hình 4. Khối phổ đồ chuẩn salbutamol và salbutamol d</i>3 tra từ thư viện NIST
(Text File) Scan 242 (8.517 min): SCAN HH STD 100PPB .D\data.ms

80 120 160 200 240 280 320 360 400 440 480
0

50
100

57
86

95 117
147

207 286

308 353
372

405 443 477 499

(mainlib) Salbutamol, tris(trimethylsilyl) ether

80 120 160 200 240 280 320 360 400 440 480
0

50
100

57
73

6
8

104
147

161 207 265 293 350
369

440
O

O
Si

Si
O

NH
Si

(Text File) Scan 241 (8.507 min): SCAN HH STD 100PPB .D\data.ms

80 120 160 200 240 280 320 360 400 440
0

50
100

57
73

86

117 147 ₂₀₇ _{265 297}
372

</div>
<span class='text_page_counter'>(5)</span><div class='page_container' data-page=5>

<i>Hình 2. Sắc ký đồ xác định salbutamol với chương trình nhiệt 2 </i>

Kết quả khảo sát thể hiện ở hình 3 cho thấy có 4 mảnh ion chính là 73, 86, 369 và 372.
Khi so sánh với thư viện NIST, các mảnh m/z = 73 và 86 của salbutamol và salbutamol d3 là

trùng nhau, các mảnh m/z = 369 của salbutamol và 372 salbutamol d3 là tách biệt rõ rệt (hình
3 và 4). Do đó chúng tơi chọn mảnh m/z = 369 là mảnh ion định lượng của salbutamol, và
mảnh ion 372 là mảnh ion định lượng cho salbutamol d3 theo chương trình 2 ở chế độ SIM.
So sánh tài liệu tham khảo [14, 15], chương trình nhiệt được lựa chọn có hiệu quả sắc ký
tương đương nhưng thời gian tách ngắn hơn, do đó tiết kiệm được thời gian và hóa chất.

<i>Hình 3. Khối phổ đồ chuẩn salbutamol và salbutamol d</i>3

<i>Hình 4. Khối phổ đồ chuẩn salbutamol và salbutamol d</i>3 tra từ thư viện NIST
(Text File) Scan 242 (8.517 min): SCAN HH STD 100PPB .D\data.ms

80 120 160 200 240 280 320 360 400 440 480
0
50
100
57
86
95 117
147
207 286
308 353
372

405 443 477 499

(mainlib) Salbutamol, tris(trimethylsilyl) ether

80 120 160 200 240 280 320 360 400 440 480
0
50

100
57
73
86
104
147

161 207 265 293 350
369
440
O
O
Si
Si
O
NH
Si

(Text File) Scan 241 (8.507 min): SCAN HH STD 100PPB .D\data.ms

80 120 160 200 240 280 320 360 400 440
0
50
100
57
73
86

117 147 ₂₀₇ _{265 297}
372

401 443

Kết quả khảo sát chế độ chia dòng ở các tỉ lệ chia dòng lần lượt là 2:1, 5:1, 10:1, 20:1
với chương trình 2 và chế độ quét phổ SIM thể hiện ở Bảng 1 và 2. So sánh diện tích peak và
tỉ lệ tín hiệu/ nhiễu nền giữa chế độ tiêm mẫu chia dịng và khơng chia dòng ở các tỉ lệ khác
nhau cho thấy: chế độ tiêm mẫu khơng chia dịng cho cường độ tín hiệu và tỉ lệ tín hiệu/
nhiễu nền cao nhất, đảm bảo độ nhạy của phương pháp.

<i>Bảng 1. Diện tích peak và tỉ lệ tín hiệu đo với chế độ Split (chia dòng) </i>

Dung dịch đo Tỉ lệ chia _dịng Chất phân tích Diện tích peak (S) _{nhiễu nền (S/N)}Tỉ lệ tín hiệu /

Chuẩn salbutamol
100 ppb trong dung môi

2:1 Salbutamol 11275 1251,9

Salbutamol d3 19163

5:1 Salbutamol 5991 1068,9

Salbutamol d3 10355

10:1 Salbutamol 3486 582,7

Salbutamol d3 5883

20:1 Salbutamol 1798 268,0

Salbutamol d3 3086

Chuẩn salbutamol
2 ppb trên nền mẫu

2:1 Salbutamol 10019 250,3

Salbutamol d3 17021

5:1 Salbutamol 5365 290,4

Salbutamol d3 8829

10:1 Salbutamol 2785 220,0

Salbutamol d3 4600

20:1 Salbutamol 1461 246,8

Salbutamol d3 2408

<i>Bảng 2. Diện tích peak và tỉ lệ tín hiệu đo với chế độ Splitless (khơng chia dịng) </i>

Dung dịch đo Diện tích peak (S) Tỉ lệ tín hiệu/nhiễu nền

Chuẩnsalbutamol 100 ppbtrong dung môi 35482 (Salbutamol) 1293,9

55539 (Salbutamol d3)

Chuẩn salbutamol 2 ppb trên nềnmẫu 22944 (Salbutamol) 507,6

37893 (Salbutamol d3)

<b>3.2. Kết quả xây dựng đường chuẩn và khảo sát LOD, LOQ dựa vào đường chuẩn </b>
Đánh giá sự phù hợp của đường chuẩn với thực nhiệm dựa vào việc kiểm định theo
chuẩn Student: từ phương trình đường chuẩn: r2 _{= 0,9994;} 2

adjusted

</div>
<span class='text_page_counter'>(6)</span><div class='page_container' data-page=6>

<i> </i>

<i>Hình 5. Đồ thị biểu diễn đường chuẩn của salbutamol với dẫn xuất (BSTFA:TMCS) </i>

Từ phương trình hồi quy ở Hình 5, tính LOD, LOQ theo cơng thức (1), kết quả thu
được: LOD = 0,12 ppb, LOQ = 0,41 ppb

0,99,f=N+m-2 S N+m LOD

LOD = t ; LOQ = 10×

b Nm 3

<i>residue</i>

 (1)

Dựa vào qui trình xử lý mẫu ở sơ đồ 1, LOD và LOQ trên nền mẫu lần lượt là: 0,018
ppb và 0,049 ppb.

Theo thông tư số 01/2016/TT – BNNPTNT ngày 15/2/2016 quy định mẫu dương tính

theo phương pháp định lượng, hàm lượng giới hạn tối đa cho phép của salbutamol trong thịt
là < 5 ppb [3]. Thông thường, giá trị LOD phải thấp hơn giá trị giới hạn tối đa cho phép
khoảng 10 lần mới đảm bảo độ tin cậy. Dựa vào LOD tính được nhỏ hơn 10 lần giới hạn tối
đa cho phép, do đó, phương pháp xác định là đáng tin cậy. So sánh với tài liệu tham khảo
phương pháp phân tích thu được đạt độ nhạy cao hơn, giới hạn phát hiện thấp hơn, có thể áp
dụng để xác định salbutamol trong thực tế [14,15].

</div>
<span class='text_page_counter'>(7)</span><div class='page_container' data-page=7>

<b>3.3. Kết quả khảo sát hiệu suất thu hồi của quy trình và phân tích mẫu thật </b>

Kết quả thu được từ quá trình khảo sát hiệu suất thu hồi trên mẫu thịt, cho thấy salbutamol
trong mẫu cho hiệu suất thu hồi 100,7% thuộc khoảng chấp nhận (80%  H  110%). Do đó,
quy trình trên có thể áp dụng xác định salbutamol trên nền mẫu thịt.

Để xác định salbutamol có trong mẫu, chúng tơi tiến hành chiết salbutamol và tạo dẫn xuất
với (BSTFA:TMCS). Kết quả phân tích mẫu theo quy trình xác định salbutamol với thuốc thử
(BSTFA:TMCS) cho thấy hàm lượng salbutamol trong mẫu thịt có hàm lượng dưới ngưỡng phát
hiện của phương pháp. Do đó phù hợp với quy định về hàm lượng tồn dư salbutamol cho phép ở
mẫu thịt theo Thông tư 01/2016 của Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn.

<b>4. KẾT LUẬN </b>

Kết quả nghiên cứu và khảo sát qui trình phân tích salbutamol bằng phương pháp GC/MS
sử dụng nội chuẩn đồng vị Salbutamol – d3 thu được những kết quả như sau: chế độ quét phổ:
SIM; chương trình nhiệt: 120ºC giữ 0,1 phút, tăng 15 ºC /phút đến 245 ºC, tăng 30 ºC /phút
đến 300 ºC giữ 10 phút; chế độ tiêm mẫu: Splitless; LOD và LOQ của đường chuẩn lần lượt là
LOD = 0,12 ppb, LOQ = 0,41 ppb, khoảng tuyến tính từ 10 ppb – 200 ppb, LOD và LOQ trên
nền mẫu lần lượt là: 0,018 ppb và 0,049 ppb. So sánh với tài liệu tham khảo [14, 15] cho thấy
phương pháp thu được tối ưu hơn, độ nhạy cao hơn.

Tuy nhiên, nghiên cứu vẫn còn nhiều hạn chế, cần khảo sát thêm một số vấn đề sau: tạo

dẫn xuất với một số thuốc thử khác như: MSTFA, (MSTFA: NH4I: DTE),…; lựa chọn cột
chiết có khả năng chiết tốt nhất; lựa chọn dung mơi chiết để chiết hồn tồn salbutamol ra
khỏi mẫu; khảo sát các yếu tố ảnh hưởng đến phản ứng tạo dẫn xuất như: thời gian, nhiệt
độ,.. phân tích trên mẫu chuẩn được chứng nhận CRM (Certified Reference Material).

<b>TÀI LIỆU THAM KHẢO </b>

1. Chen C., Li H., Fan Y. - Determination of salbutamol sulfate in medicaments by capillary
<b>electrophoresis with contactless conductivity detection, Se Pu 29 (2) (2011) 137-140. </b>
2. Liu Caiyun, Wang Long - Research on determination of clenbuterol and salbutamol in pork

by SPE/HPLC, International Conference on New Technology of Agricultural Engineering,
2011.

3. Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn - Thông tư số 28/2014/TT-BNNPTNT Ban
hành danh mục hóa chất, kháng sinh cấm nhập khẩu, sản xuất, khinh doanh và sử dụng
trong thức ăn chăn nuôi gia súc, gia cầm tại Việt Nam, 2014.

4. Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn - Thông tư 01/2016/TT-BNNPTNT Sửa đổi,
bổ sung một số điều của thông tư số 57/2012/BNNPTNT ngày 07/11/2012 Quy định
việc kiểm tra, giám sát và xử lý vi phạm các chất cấm thuộc nhóm Beta-agonist trong
chăn nuôi, 2016.

5. Cục Quản lý dược - Công văn số 21590/QLD-KD về việc tạm ngừng nhập khẩu nguyên
liệu salbutamol và clenbuterol, Bộ Y tế, 2015.

6. Council Directive 96/23/EC concerning the performance of analytical methods and the
interpretation of results, 2002, pp. 8-35.

</div>
<span class='text_page_counter'>(8)</span><div class='page_container' data-page=8>

8. Trung tâm dịch vụ phân tích thí nghiệm TP. HCM - Quyết định về việc quy định các

bước xác định hàm lượng chất clenbuterol và salbutamol, 16/04/2012.

9. Chu Vân Hải - Phân tích các chất kích thích tăng trưởng họ β-agonist (clenbuterol và
salbutamol) trong thịt heo, gan heo, thức ăn nuôi heo bằng phương pháp sắc ký ghép
khối phổ GC/MS, Trung tâm dịch vụ phân tích thí nghiệm TP. HCM, 2008.

10. Chu Phạm Ngọc Sơn - Tài liệu tập huấn về sắc ký khí ghép khối phổ GC/MS, 03/2016.
11. Nguyễn Thị Thu Thủy - Đánh giá hàm lượng các chất β- agonist (clenbuterol và

salbutamol) trong thức ăn gia súc và dư lượng trong thịt gia súc bằng kỹ thuật sắc ký
lỏng ghép khối phổ, Luận án Tiến sĩ, Đại học Khoa học Tự nhiên TP. HCM, 2011.
12. Zhang X.Z., Gan Y.R., Zhao F.N. - Determination of salbutamol in human plasma and

urine by high-performance liquid chromatography with a coulometric electrode array
system, Journal of Chromatographic Science 42 (5) (2004) 263-267.

13. Li C., Wu Y. L, Yang T., Zhang Y., Huang-Fu W.G. - Simultaneous determination of
clenbuterol, salbutamol and ractopamine in milk by reversed-phase liquid
chromatography tandem mass spectrometry with isotope dilution, Journal of
Chromatography A 1217 (50) (2010) 7873-7877.

14. TCVN : 2014, Thực phẩm – xác định dư lượng β2- agonist trong thịt gia súc – Phương
pháp sắc ký ghép hai lần khối phổ.

15. Cơ quan Kiểm tra vệ sinh thú y Trung ương II - Xác định dư lượng salbutamol,
clenbuterol trong thịt và nước tiểu gia súc bằng phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ
GC/MS, Tài liệu lưu hành nội bộ, 2016.

16. Montrade M. P., Monteau F., Siliart B., Andre F.- Multi-residue analysis for β-agonistic
drugs in urine of meat-producing animals by gas chromatography-mass spectrometry,

Analytica Chimica Acta 275 (1–2) (1993) 253-268.

17. Trần Cao Sơn - Thẩm định phương pháp trong phân tích hóa học và vi sinh, Nhà xuất
bản Khoa học và Kỹ thuật, Hà Nội, 2010.

<b>ABSTRACT </b>

DETERMINATION OF SALBUTAMOL IN MEAT SAMPLES WITH GC-MS METHOD
An-Sa Tran Nguyen*, Vi-Hau Nguyen Trang
<i>Ho Chi Minh City University of Food Industry </i>
<i>*Email: </i>
The optimal conditions for determination of salbutamol in meat samples by GC/MS
method with Agilent 7890N system, MSD 5975C, HP – 5MS have been investigated. The
parameters for the column oven, injector, detector, limit of detection (LOD), and limit of
quantitation (LOQ), recovery performance, conditions of sample processing methods have
been also examined. The results of the survey were obtained with the scanning mode: SIM;
program heat: 120<b> ºC (0,1 min), increase 15 ºC/min to 245 ºC, increase 30 ºC /min to 300 ºC </b>
for 10 minutes; injection mode: splitless; LOD = 0.12 ppb, LOQ = 0.41 ppb, linear range
from 10 ppb to 200 ppb, LOD and LOQ on the sample were 0.018 ppb and 0.049 ppb,
respectively, and the recovery of method: 100.7 %.

</div>

<!--links-->