Phân lập chất từ cao n-butanol của lá cây Lá đắng (Vernonia amygdalina Del.), họ Cúc (Asteraceae)
Bạn đang xem bản rút gọn của tài liệu. Xem và tải ngay bản đầy đủ của tài liệu tại đây (2.48 MB, 39 trang )
T R ƯỜ N G ĐẠ I H Ọ C C Ầ N T H Ơ
K H OA K H OA H Ọ C T Ự N H I Ê N
BÁO CÁO LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC
Phân lập chất từ cao n-butanol
của lá cây Lá đắng (Vernonia amygdalina Del.),
họ Cúc (Asteraceae)
Cán bộ hướng dẫn:
PGs.Ts Tôn Nữ Liên Hương
Sinh viên thực hiện:
Huỳnh Văn Lợi
1
NỘI DUNG BÁO CÁO
1
Giới thiệu
2
Thực nghiệm
3
Kết quả và thảo luận
4
Kết luận và kiến nghị
2
1.1 Giới thiệu về cây Lá đắng
Tên khoa học: Vernonia amygdalina Del.
Họ Cúc (Asteraceae)
Tên khác: Lá đắng, mật gấu nam,…
Phân bố: Hầu hết các nước vùng nhiệt
đới châu Phi, Nigeria, Zimbabwe,…
Audu, S.A. and et al, 2012. A study review of documented phytochemistry of Vernonia amygdalina (Family Asteraceae) as the basis for
pharmacologic activity of plant extract. Journal of Natural Sciences Research, 2(7): 1-8
Clement, E. and et al, 2014. Significance of Bitter Leaf (Vernonia amagdalina) in Tropical Diseases and Beyond: A Review. Malar
Chemoth Cont, 3(1): 1-10.
1
Giới thiệu
3
1.2 Tác dụng dược lý
Y học dân gian
Trị sốt, sốt rét
Trị tiêu chảy, kiết lỵ
Trị viêm gan
Rối loạn tiêu hóa,
giun sán,…
1
Giới thiệu
Hoạt tính sinh học
Kháng nấm, khuẩn
Hạ đường huyết
Ức chế các dòng tế
bào ung thư: BT-549,
MCF-7,…
4
1.3 Thành phần hóa học
Steroid glycoside
Vernodalin
Vernolide
Apigenin 7-O-β-glucoside
1
Giới thiệu
Syringaresinol-O-β-glucoside
5
2.1 Điều chế cao thô
Bột lá
14,5 Kg
Nguyên liệu
Ngâm dầm với methanol
Cao tổng
2,0 Kg
Chiết lỏng-lỏng với các dung môi
có độ phân cực tăng dần
Cao Hex
350 g
2
Cao DC
16 g
Thực nghiệm
Cao Ea
36 g
Cao n-butanol
125 g
Cao
Me/H2O
6
2.2 Phân lập hợp chất từ n-butanol
Cao n-butanol
125 g
Sắc ký cột với dianion HP-20
VB1
VB2
VB3
VB4
VB5
Sắc ký cột với RP-C18
Sắc ký cột với RP-C18
VB2.1
VB2.2
VB3.1
… VB3.2 VB2.5 …
VB3.5
Sắc kýSắc
cộtkývới
cộtRP-C18
pha thường
VB2.2.1
V3.1.1 VB2.2.2…
VA.Bu03
2
Thực nghiệm
VB2.2.3
VB3.1.7VB2.2.4… VB2.2.5
VB3.1.12
VA.Bu04
VA.Bu07
7
2.3 Hoạt tính kháng viêm in vitro
Albumin
Test solution
Đệm Phosphate
Test cotrol
OD tại 255 nm
2
Thực nghiệm
Dịch cao chiết
Product control
Standard solution
Ủ 37 oC, 20 phút
Ủ 57 oC, 3 phút
Thêm đệm
Làm lạnh
8
3.1 Hợp chất VA.Bu03
- Dạng gum, không màu
- Khối lượng: 15 mg
- Tan tốt trong EtOAc và MeOH
- Rf 0,43 trong hệ dung môi
DC:Me (9:1)
Ea:Me
(95:5)
3
Kết quả và thảo luận
DC:Me
(9:1)
C:Me
(85:15)
9
CTPT: C5H9NO2
[M] = 112 amu
[M-OCH3]+
m/z 84,0
3
Kết quả và thảo luận
[M+Na]+
m/z 138,8
10
3
Kết quả và thảo luận
11
DEPT90
DEPT135
3
Kết quả và thảo luận
12
C-5
–OCH3
C-3 C-4
H-5
–OCH3
H-3
H-4
3
Kết quả và thảo luận
13
C-2
C-5
H-5
–OCH3
H-4
H-3
3
Kết quả và thảo luận
14
–OCH3
C-3 C-4
H-5
–OCH3
H-4
H-3
3
Kết quả và thảo luận
15
Bảng dữ liệu phổ của VA.Bu03 và 5-methoxypyrrolidin-2-one
Vị trí
C/H
VA.Bu03 (CDCl3)
5-Methoxypyrrolidin-2-one [54] (CD3OD)
δH ppm (J, Hz)
δC ppm
δH ppm (J, Hz)
δC ppm
2
-
179,4
-
181,6
3a
2,50 (m)
3b
2,22 (m)
4a
2,28 (m)
4b
2,07 (m)
5
4,89 (d, 6,0)
87,1
4,85 (d, 6,0)
88,9
-OCH3
3,31 (s)
54,4
3,30 (s)
54,8
2,45 (m)
28,3
2,14 (m)
30,3
2,25 (m)
27,9
2,00 (m)
29,5
VA.Bu03 được xác định là Pterolactam
(IUPAC: 5-methoxypyrrolidin-2-one)
3
Kết quả và thảo luận
16
3.2 Hợp chất VA.Bu04
- Dạng bột, màu vàng
- Khối lượng: 6,5 mg
- Tan tốt trong MeOH và
DMSO
- Rf 0,61 trong hệ dung môi
C:Me (85:15)
- Hấp thụ UV bước sóng
254 nm
3
Kết quả và thảo luận
DC:Me C:Me Ea:Me
(8:2) (85:15) (9:1)
17
3.3 Hợp chất VA.Bu07
- Dạng gum, màu vàng đậm
- Khối lượng: 4 mg
- Tan ít trong MeOH, tan tốt
trong DMSO
- Rf 0,24 trong hệ dung môi
EtOAc:Me (85:15)
- Hấp thụ UV bước sóng 254
nm
3
Kết quả và thảo luận
18
[M+H]+
m/z 284,9
3
Kết quả và thảo luận
19
[M-CH3]m/z 267,8
[M-H-]m/z 282,8
CTPT: C16H12O5
[M] = 284 amu
3
Kết quả và thảo luận
20
VA.Bu04
(MeOD)
VA.Bu07
(DMSO)
3
Kết quả và thảo luận
21
VA.Bu04
(MeOD)
VA.Bu07
(DMSO)
3
Kết quả và thảo luận
22
C-6’
C-5’
C-2’
C-3
C-6
C-8
H-6’
H-2’
H-5’
H-3
H-8
H-6
3
Kết quả và thảo luận
23
C-4
C-7 C-2 C-5
C-9
H-6’
H-2’
H-5’
H-3
H-8
H-6
3
Kết quả và thảo luận
24
C-2
C-4’ C-3’
C-1’ C-5’ C-2’
C-6’
H-6’
H-2’
H-5’
3
Kết quả và thảo luận
25
