BÁO CÁO THÍ NGHIỆM VI SINH MÔI TRƯỜNG
GVHD: Th.S LÊ THỊ HỒNG TUYẾT
LỚP 05KT MT3 – NHÓM 16
***
BÀI 1: XÁC ĐỊNH COLIFORMS TỔNG SỐ (PP MPN)
Giai đoạn 1
- Chuẩn bị pipet → sấy khử trùng, để nguội
- Chuẩn bị nước cất, môi trường LB → hấp khử trùng, làm nguội
- Pha loãng mẫu theo dãy nồng độ thập phân và cấy vào môi trường LB. Ủ 370C – 24h
Giai đoạn 2
- Đọc kết quả LB (+)
- Chuẩn bị môi trường BGBL → hấp khử trùng, làm nguội
- Cấy chuyền từ mt LB (+) qua môi trường BGBL. Ủ 370C
Giai đoạn cuối
Đọc ống (+) ở mt BGBL và tính kết quả.
Tiến hành


Bước 1: Lấy mẫu và pha loãng mẫu theo dãy nồng độ thập phân 10-1, 10-2 và 10-3
Bước 2: Mỗi độ pha loãng hút 3 lần, mỗi lần 1 ml cấy vào 3 ống nghiệm môi trường LB.
Hút 3 nồng độ liên tiếp, mỗi nồng độ 3 ống nghiệm.
Bước 3: Ủ 370C - 24h
Bước 4: Ống dương tính là có bọt khí trong ống durham. Ghi kết quả
Bước 5: Tra bảng Mac Crady – loạt 3 ống nghiệm ở 3 nồng độ liên tiếp.
MT LB

ỐNG NGHIỆM

ỐNG NGHIỆM

ỐNG NGHIỆM

ỐNG NGHIỆM

ỐNG NGHIỆM

ỐNG NGHIỆM

ĐẠT
KHÔNG

MT BGBL

ĐẠT
KHÔNG
Kết quả & nhận xét
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................


BÀI 2: XÁC ĐỊNH COLIFORM PHÂN (PP MPN)
Giai đoạn 1; Giống Coliform
Giai đoạn 2

- Chuẩn bị môi trường EC → hấp khử trùng, làm nguội
- Cấy chuyền từ môi trường LB (+) sang môi trường EC. Ủ 44,50C – 24h
Giai đoạn cuối
- Đọc ống (+) ở mt EC và tính kết quả.
Tiến hành
Bước 1: Lấy mẫu và pha loãng mẫu theo dãy nồng độ thập phân 10-1, 10-2 và 10-3
Bước 2: Mỗi độ pha loãng hút 3 lần, mỗi lần 1 ml cấy vào 3 ống nghiệm môi trường LB.
Hút 3 nồng độ liên tiếp, mỗi nồng độ 3 ống nghiệm.
Bước 3: Ủ 370C - 24h
Bước 4: Ống dương tính là có bọt khí trong ống durham.
Bước 5: Cấy vào ống canh EC Broth. Ủ ở 44,5oC – 24h.

MT EC

ỐNG NGHIỆM

ỐNG NGHIỆM

ỐNG NGHIỆM

ĐẠT
KHÔNG
Kết quả & nhận xét
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................

.................................................................................................................................................


BÀI 3: XÁC ĐỊNH E.COLI (PP MPN)
Giai đoạn 1; Giống Coliform
Giai đoạn 2; Giai đoạn 2 giống Coliform phân
Giai đoạn 3
- Chuẩn bị môi trường trypton → hấp khử trùng, làm nguội
- Đọc kết quả EC (+) và cấy chuyền qua mt Trypton. Ủ 44,50C – 24h
Giai đoạn cuối
- Thực hiện nhỏ 3 giọt thuốc thử Kovac’s vào môi trường Trypton (thử nghiệm Indol).
Ghi nhận ống xuất hiện màu đỏ trên bề mặ. Tính kết quả
MT Trypton

ỐNG NGHIỆM

ỐNG NGHIỆM

ỐNG NGHIỆM

ỐNG NGHIỆM

ỐNG NGHIỆM

ỐNG NGHIỆM

ĐẠT
KHÔNG

TN Indol


ĐẠT
KHÔNG
Kết quả & nhận xét
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................


BÀI 4: XÁC ĐỊNH COLIFORMS TỔNG SỐ (PHƯƠNG PHÁP MÀNG LỌC)
Giai đoạn 1
- Chuẩn bị môi trường m ENDO Agar LES → đun sôi rót vào đĩa petri để đông lại
- Thao tác lọc mẫu → Úp ngược đĩa ủ 370C – 24h
- Đếm số lượng khuẩn lạc có màu đỏ đậm đến ánh kim. Tính kết quả
Kết quả & nhận xét
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................

BÀI 5: XÁC ĐỊNH TỔNG VI KHUẨN HIẾU KHÍ (PP ĐỔ ĐĨA)
Thực hiện
- Chuẩn bị nước cất, môi trường PCA → hấp khử trùng, làm nguội đến 450C
- Chuẩn bị pipet → sấy khử trùng, để nguội
Tiến hành thao tác đổ đĩa → Để đông → Úp ngược đĩa ủ 370C – 24h
- Đếm tất cả các khuẩn lạc mọc trong đĩa.
Kết quả & nhận xét
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................
.................................................................................................................................................