i

I H C THÁI NGUYÊN
I H C NÔNG LÂM

NGUY N TH CHÍNH

KHÓA LU N T T NGHI

H

o

IH C

: Chính quy

Chuyên ngành

: Công ngh sinh h c

Khoa

: CNSH - CNTP

Khoá h c

: 2011 - 2015


ii

I H C THÁI NGUYÊN
I H C NÔNG LÂM

NGUY N TH CHÍNH

KHÓA LU N T T NGHI

H

o

IH C

: Chính quy

Chuyên ngành

: Công ngh sinh h c

L p

: K43 - CNSH

Khoa

: CNSH - CNTP

Khoá h c


: 2011 - 2015

Gi

ng d n : 1. ThS.

ng


i

Em xin ch
Lâ
NSH (khoa
và Th.S

ThS.
.

!
Thái Nguyên, ngày 30 tháng 05
Sinh viên


ii

B ng 4.1 K t qu nghiên c u

ng c


n hi u qu nhân nhanh ch i

cây Keo lai ...........................................................................................................35
B ng 4.2 K t qu nghiên c u

ng c

n hi u qu nhân nhanh

ch i cây Keo lai...................................................................................................38
B ng 4.3 K t qu nghiên c u

ng c a s k t h p gi

n

hi u qu nhân nhanh ch i cây Keo lai ..............................................................41
B ng 4.4 K t qu nghiên c u nh

ng c a s k t h p gi

n

hi u qu nhân nhanh ch i cây Keo lai ..............................................................44
B ng 4.5. K t qu nghiên c u

ng c

n hi u qu ra r ch i cây Keo


lai ..........................................................................................................................47
B ng 4.6. K t qu nghiên c u

ng c

n hi u qu ra r ch i cây

Keo lai ..................................................................................................................49
B ng 4.7.K t qu nghiên c u

ng c a giá th

n t l s ng c a cây Keo lai

...............................................................................................................................51


iii

DANH M C BI

Bi

4.1.

ng c

n hi u qu nhân nhanh ch i cây Keo lai (sau

30 ngày)................................................................................................................37

Bi

4.2.

Bi

4.3.

ng c

n hi u qu nhân nhanh ch i cây Keo lai .40

ng c a s k t h p gi

n hi u qu nhân

nhanh ch i cây Keo lai .......................................................................................43
Bi

4.4

ng c a s k t h p gi

n hi u qu nhân

nhanh ch i cây Keo lai .......................................................................................45
Bi

4.5.


ng c

n hi u qu ra r ch i cây Keo lai...................48

Bi

4.6.

ng c

n hi u qu ra r ch i cây Keo lai.................50


iv

DANH M C HÌNH NH

Hình 4.1. nh

ng c

Hình 4.2

ng c

Hình 4.3 K t qu nghiên c u

n kh

ch i Keo lai BV32.....36


n kh

...................................39

ng c a s k t h p gi a BAP

n

hi u qu nhân nhanh ch i cây Keo lai ..............................................................42
Hình 4.4 K t qu nghiên c u

ng c a s k t h p gi

n

hi u qu nhân nhanh ch i cây Keo lai ..............................................................45
Hình 4.5. K t qu nghiên c u

ng c

n hi u qu ra r ch i cây Keo

lai ..........................................................................................................................48
Hình 4.6. K t qu nghiên c u

ng c

n hi u qu ra r ch i cây


Keo lai ..................................................................................................................50
Hình 4.7:K t qu nghiên c u

ng c a giá th

n t l s ng c a cây Keo lai

...............................................................................................................................52


v

BAP

: Benzylamino purine

IBA

: Indol butyric acid

NAA

: Naphthyl acetic acid

MS

: Murashige & Skoog Medium

MS*


: MS

n(
vitamin)

CT

:C

HSNC
TB
W/w
V/v

: Trung bình


vi

PH N 1: M
1.1.

U......................................................................................................1
................................................................................................................1

1.2 M c tiêu nghiên c u...............................................................................................3
1.3 M

u..............................................................................................3


1.4.

c và th c ti n c

tài..............................................................3

PH N 2: T NG QUAN TÀI LI U.........................................................................5
2.1. Ngu n g c c a cây Keo lai gi ng BV32..............................................................5
2.1.1. Lai gi ng nhân t o ...............................................................................................5
2.1.2. Dòng Keo lai BV32.............................................................................................5
2.2. Tình hình nghiên c u v

c.................................7

2.2.1. Tình hình nghiên c u trên th gi i.....................................................................7
2.2.2 Tình hình nghiên c

c........................................................................8

2.3. Khái ni m nuôi c y mô t bào th c v t ................................................................9
khoa h c c a nhân gi ng b ng nuôi c y mô t bào th c v t...................9
2.4.

a t bào th c v t ....................................................................9

2.4.2. S phân hóa và ph n phân hóa c a t bào th c v t........................................10
n chính trong nuôi c y mô t bào th c v t ....................................11
n chu n b .............................................................................................11
n kh trùng m u, c y kh


ng.......................................................11

n t o ch i và nhân nhanh ch i............................................................12
n t o cây mô hoàn ch nh.....................................................................12
n chuy
2.6. Các y u t

.........................................12
ng t i k t qu nuôi c y mô t bào ...................................13

u ki n vô trùng .............................................................................................13
2.6.2. V t li u nuôi c y................................................................................................14


vii

ng nuôi c y..........................................................................................15
2.7. Nh ng v

trong nhân gi ng in vitro.............................................................26

2.7.1. Tính b

nh v m t di truy n .........................................................................26
.....................................................................................................27
...........................................................................................27
..............................................................................................................28

PH N 3:


NG, N

U.....29

ng (v t li u) ..............................................................................................29
m và th i gian nghiên c u .......................................................................29
m nghiên c u .........................................................................................29
3.2.2. Th i gian nghiên c u.........................................................................................29
3.3. N i dung nghiên c u ............................................................................................29
3.3.1 N i dung 1: Nghiên c u

ng c a m t s ch
n kh

3.3.2. N i dung 2: Nghiên c u
n kh

u ti

ng

i cây Keo lai........29
ng c a m t s ch

u ti

ng

c a cây Keo lai .............................................29


3.3.3. N i dung 3: Nghiên c u

ng c a m t s giá th

n t l s ng c a

cây Keo lai ...........................................................................................................30
u .....................................................................................30
3.

u ki n thí nghi m.........................................................................................30
u n i dung 1: Nghiên c u
ch

u ti

ng c a m t s
n kh

nhanh ch i cây Keo lai .......................................................................................30
u n i dung 2: Nghiên c u
ch

u ti

n kh
u n i dung 3: Nghiên c u

th


ng c a m t s
c a cây Keo lai..32
ng c a m t s giá

n t l s ng c a cây Keo lai .....................................................................33


viii

lý s li u...............................................................33
PH N 4: K T QU NGHIÊN C U VÀ TH O LU N .................................35
4.1 K t qu nghiên c u

ng c a m t s ch

u ti

n hi u

qu nhân nhanh ch i cây Keo lai.......................................................................35
4.1.1 K t qu nghiên c u

ng c

n hi u qu nhân nhanh ch i cây

Keo lai ..................................................................................................................35
4.1.2 K t qu nghiên c u

ng c


n hi u qu nhân nhanh ch i

cây Keo lai (Acacia hybrids)..............................................................................38
4.1.3 K t qu nghiên c u

ng c a s k t h p gi a BAP v

n hi u

qu nhân nhanh ch i cây Keo lai.......................................................................40
4.1.4 K t qu nghiên c u

ng c a s k t h p gi

n hi u

qu nhân nhanh ch i cây Keo lai.......................................................................43
4.2 K t qu nghiên c u

ng c a m t s ch

u ti

n hi u

qu ra r ch i cây Keo lai...................................................................................46
4.2.1. K t qu nghiên c u

ng c


n hi u qu ra r ch i cây Keo lai

...............................................................................................................................46
4.2.2. K t qu nghiên c u

ng c

n hi u qu ra r ch i cây Keo

lai ..........................................................................................................................49
4.3 Nghiên c u

ng c a giá th

n t l s ng c a cây Keo lai nuôi c y mô

.................................................................................................51
PH N 5: K T LU N VÀ KI N NGH ...............................................................53
5.1. K t lu n..................................................................................................................53
5.2. Ki n ngh ...............................................................................................................53
TÀI LI U THAM KH O .........................................................................................1
PH L C ......................................................................................................................4


1

1.1
Acacia hybrids


Keo lai BV32

Acacia mangium) và Keo lá tràm (Acacia
auriculiformis) (

h Kh , 1999)

và cs, 1997)
b ov
Kh , 1999)
c nhi

là khó gây cháy r ng vì thân Keo lai có
i r ng Keo ít có th c bì, cây Keo l i ít lá.
15-20 m3

20-25 m3

30-35 m3

Cây K

S
124
815

980

830
M


là 356 côn
Keo lai t

và cs, 1997).
u s n xu t lâm nghi

u cây

tr ng lâm nghi p, không ch rút ng n chu k kinh doanh, tr ng r ng, mang l i
hi u qu kinh t
thêm ngu n tài nguyên r

u khá cao mà còn góp ph n cân b ng, làm phong phú
suy gi

, 1999).


2

,
,

,

nên Keo là m t trong các

c ch n làm cây tr ng r ng chính
c tr ng


h u kh p các t nh trung du, mi

tr ng trong vi c phát tri n kinh t xã h i
s ng c

Vi t Nam.

Vi

c bi

iv

i

i dân các t nh mi

t t, có giá tr kinh t cao, có th
xu t kh

ng v nguyên li u gi y,

, 1999).
-7 m3

-30 m3

Ke


và cs, 2003).

.. N

ng d ng Công ngh sinh h c vào lai gi ng là m

i

invitro
invitro

g...

và
cs, 2011).


3

Nghiên c u

ng c a m t s ch

n kh

i cây Keo lai.
Nghiên c u

ng c a m t s ch


n kh

ch i cây Keo lai.
Nghiên c u
1.4 Ý

ng c a m t s giá th
c và th c ti n c

n t l s ng c a cây Keo lai.
tài

c:
+ Giúp sinh viên c ng c và h th ng l i ki n th
+ Giúp sinh viên rèn luy n k
+ Bi

c.

c t p nghiên c u khoa h c.
um ts v

khoa h c, x lý

và phân tích s li u, cách trình bày m t bài báo khoa h c.
+S d
và ch

y mô t bào nh m nâng cao h s nhân


ng cây Keo m i.
c ti n:


4

Nâng cao hi u qu nhân gi ng b
làm gi m chi phí giá
c p gi ng Keo m i ra th

y mô t bào,
t, ch

ng

ng nhu c u


5

N2

c

ng BV32

Lai gi ng (t

m k t h p nhi


tính t t c a các gi ng cây tr ng (

và cs, 1999).

Lai gi ng nhân t o b ng th ph n có ki m soát
phép k t h p các tính tr ng mong mu n trong m t gi ng lai, làm
gi

c

c cho
ch n

n k ti p.
T

c ch n l c cây tr i làm b m , t o ra các t h p lai c n

thi t, kh o nghi

n l c cây

là cách t t nh

i F1, và các th h ti p theo

t o ra các gi ng lai mong mu n.

2.1.2. Dòng Keo lai BV32
Acacia hybrids là


Keo lai BV32

Acacia mangium) và Keo lá tràm (Acacia
auriculiformis) (

, 2006)

y cao (

và cs, 1997)

b ov

t

, 2006).

Thông tin v dòng Keo lai BV32:
-

ng g i: BV32

- Tên loài: Keo lai nhân t o
- Tên la tinh: Acacia mangium × Acacia auriculiformis
-

Fabacae)
Mimosoideae)



6

-

- Hà Tây

.
-

So sánh v th

ng:

ng: 103 dm3/ cây

-

- Keo lá tràm: 54 dm3/cây
- Keo lai dòng BV32: 179,2 dm3/cây
Công d ng:
- G nh dung làm nguyên li u gi

m , ván s i úp.

- G l
m hình thái:
- Thân, tán

-30


-80 cm. Thân

- Hoa, q
nách lá.

-

hanh

-800 m

- Cây có


7

.

Darus
môi

Skooge

(MS)

có

thêm


6-

(Gamborg.O.L và cs, 1995).

cao >0,5
% (Gamborg.O.L và cs,
1995).

( Trindate. H và cs, 1990).

in vitro
WPM + 3% Sucrose + 0,8 % A
25 oC (± 4 oC

gian 20 phút (Sharma.J.K, 1994).

ng là


8

2.2.2 T

trong
CNSH,

n di

... N
(


và cs, 2006).

hom và 8-

(
y mô

, 2006).

c ta

công tác nhân gi

gi ng Keo lai có

y mô

Keo lai

tài KH03.03 n

trên c
(1996), nhóm

nghiên c
cho m
v

th

dòng Keo lai và thu
2

0,1% v

nghiên c

ts k

nh

sung

h trùng m

i gian 2, 4, 6, 8, 10, 12 phút trong tháng 2, 5, 8,

10 và 12 cho th y trong 8 - 10 phút cho k

t.

hoà sinh tr

ppm) và BAP (2 ppm) + Kn

y ch

a ch



9

(0,05 ppm) và môi tr

ch
n kh n

riêng bi

ppm) cho t

cao (80-92)

BV32, BV33. N

t cho dòng BV16 (65%), BV5

(50%)

;

ng in vitro (Ngô Xuân Bình và cs, 2003).

- Nu

i

-

và cs, 2006).



10

và cs, 2005).

và cs, 2005).

n phân hoá

.

Hùng, 2009).


11

Phân hóa

T bào phôi

T bào dãn

Ph n phân hóa

G

ngu

nhiên


và cs, 2011).

T bào chuy n


12

và

CO2
.

quan tr
và cs,
2008).

-

-5 mg/l GA3
và cs, 2011).


13

in vitro

).

- 10 ngày

Hùng, 2009).

Trong toàn

quá tr

in vitro

cao (1,2- 1,5 atm; 120130oC).
-

(60-600oC)

2,

Ca(OCl)2 (hypoclorit canxi); H2O2 (oxy già),... C

NaClO (hypoclorit natri);


14

-

có kích

0,025-

Có h


.
+

25-30oC

-

và

và cs, 2009).

T

và dòng cây
và sc, 2008).
-


15

2005).
-

.
-

Kiên, 2002).
-

m, thân, là,


-

Kim Thanh và cs, 2005).

M

môi t
m

2.6.3

in vitro