Xác định điểm đẳng điện của casein
Bạn đang xem bản rút gọn của tài liệu. Xem và tải ngay bản đầy đủ của tài liệu tại đây (88.45 KB, 2 trang )
XÁC ĐỊNH ĐIỂM ĐẲNG ĐIỆN CỦA PROTEIN CASEIN
1/ Nguyên tắc
Các phân tử protein là các polymer có tính điện ly lưỡng cực. Trong dung dịch, khi pH thay đổi nó
phân ly tạo thành các nhóm tích điện dương và các nhóm tích điện âm khác nhau. Đối với mỗi
protein sẽ có một giá trị pH xác định mà tại đó tổng số điện tích âm bằng tổng số điện tích dương,
khi đó phân tử protein trung hòa về điện, pH đó gọi là điểm đẳng điện của protein. Tại điểm đẳng
điện, dung dịch protein không bền, dễ bị kết tủa.
2/ Thực hành
1.1. Nguyên liệu và hóa chất
- Dung dịch acid acetic (CH3COONa) 0,1N
: 200ml
- Dung dịch natri acetate (CH3COONa) 0,1N
: 50ml
-
Dung dịch casein 0,4%: Cân 0,4g casein cho vào becher 100ml và thêm 20ml dung dịch
CH3COONa 0,1N. Đặt lên nồi cách thủy đun nóng để hòa tan hoàn toàn. Chuyển sang bình định mức
100ml và định mức tới 100ml bằng dung dịch CH3COONa 0,1N.
- Nước cất
: 50ml
1.2. Dụng cụ và thiết bị
- Ống nghiệm : 10 ống
- Pipette 1ml : 02 pipette
- Bình định mức 100ml : 01 bình
- Becher 100ml : 03 cốc
- Nồi cách thủy : 01 cái
1.3. Tiến hành
Lấy dung dịch CH3COOH 0,1N và nước vào 5 ống nghiệm theo thứ tự như bảng sau:
Lắc đều, sau đó thêm vào mỗi ống 1ml dung dịch casein và theo dõi sự biến đổi của chúng trong mỗi
ống nghiệm.
1.4. Kết quả
Mức độ kết tủa: mức độ giảm dần lượng kết tủa trong các ống nghiệm theo thứ tự như sau:
3>4>5>2=1
Kết luận: Điểm đẳng điện protein Casein gần nhất với giá trị 4.7
1.5. Giải thích
- Casein là một chất điện ly lưỡng cực, nên trạng thái tích điện của protein này tùy thuộc vào pH của
môi trường. Ở một pH nào đó mà tổng số điện tích âm và điện tích dương của phân tử protein bằng 0, nó
sẽ không di chuyển trong điện trường và dễ dàng kết tụ lại với nhau ngay cả ở môi trường không có điện
trường.
- Trên thực tế, người ta đã tính toán được điểm đẳng điện của Casein là khoảng 4,6 và gần nhất với ống
nghiệm số 03 với pH = 4,7. Kết quả trên là phù hợp với lý thuyết và khẳng định kết quả thực nghiệm là
hoàn toàn chính xác.
