Sản xuất streptokinase từ vi khuẩn streptococus
Bạn đang xem bản rút gọn của tài liệu. Xem và tải ngay bản đầy đủ của tài liệu tại đây (2.09 MB, 11 trang )
Sản xuất Streptokinase tái tổ
hợp từ S.lividans
Phạm Đăng Hoàng Mười 20113129
Diagram
Khái quát chung
Nội
dung
chính
Cơ chế hoạt động của SK
Nhân dòng gen skc mã hóa SK
Biểu hiện SK tái tổ hợp
Tinh sạch SK
1. Khái quát chung
Tắc nghẽn mạch
Ứ đọng máu với cục máu đông ~> nhồi máu cơ tim
cấp tính + đột quỵ do thiếu máu cục bộ ~> tử vong
Can thiệp
phẫu thuật
để lấy hoặc
thông tắc nghẽn,
hoặc
tạo ra mạch phụ
để cấp máu mới
Uống thuốc
thông tắc để
phân hủy cục máu
đông như
streptokinase, tPA,
urokinase,
staphylokinase,
nattokinase
Streptokinase
Pr ngoại bào do các chủng beta Streptococus
sinh tổng hợp ra
SK là chuỗi đơn, M=47kDa, 414aa, pI=4.7
E hoạt động tối thích pH=7.3-7.6
etc...
Không có hoạt tính thủy phân Pr
Cơ chế hoạt hóa của SK
là tính chất hấp dẫn đặc biệt của thể hoạt hóa
plasminogen-không có tính hoạt tính thủy phân Pr
~>hoạt hóa HPG->PN gián tiếp qua việc tạo ra
1 phức hợp ái lực cao với PG (SK-HPG)
thep tỷ lệ phân tử tương đương.
Cơ chế
hoạt động
của SK
SK + HPN <-> SK.HPN -> SK.HPG’ -> SK*.HPG
SK + HPG -> SK*.HPG
[SK*: dạng cải biến ly giải của SK]
Nhân dòng gen skc từ S.equisimilis
1
2
3
Sử dụng E.coli TG1
để nhân dòng
Sàng lọc phage trên
đĩa thạch tráng lớp
casein/plasminogen
Phân lập và phân
tích dòng tái tổ hợp
chứa skc
Biểu hiện SK ở Streptomyces lividans
Tinh sạch SK tái tổ hợp
từ S. lividans
