Trường: ĐH Nông Lâm-Huế
Khoa : Cơ Khí Công Nghệ
Lớp : BQ41
GVHD : Nguyễn Thị Vân Anh
Thành viên thực hiện:
1.Đào Thị Na
2.Lê Thị Minh Lan
3.Nguyễn Thị Tám
CÔNG NGHỆ SINH HỌC THỰC PHẨM
Khái niệm chung về phương pháp
xung điện
Phương pháp xung điện hay còn gọi là điện
biến nạp (electroporation) là phương pháp sử dụng
điện trường cường độ cao, ngắn để gây ra tính thấm
thuận nghịch qua lớp lipit kép của màng tế bào.
Xung điện làm mở rộng lỗ màng và làm mỏng
màng sinh chất, từ các lỗ đó cho phép các đại phân
tử khác nhau (AND, ARN, kháng thể…) chuyển qua
màng.
Tế bào muốn
chuyển được đặt
trong máy xung
điện có hiệu điện
thế khoảng 500
V/cm với khoảng
thời gian 4-5
phần nghìn giây
Các bước chuyển gen bằng xung điện
Máy xung điện
Một dòng điện cao
áp trong khoảnh
khắc có khả năng
tạo ra các lỗ
thủng trên màng
tế bào khiến DNA
ngoại lai từ môi
trường có thể
xâm nhập vào
trong tế bào.
Tiếp đó
xung điện
làm rối loạn
phospholipid
kép của
màng tế bào
và tạo ra các
lỗ tạm thời.
Sơ đồ plasmid chứa DNA ngoại
lai đi qua các lỗ tạm thời trên
màng bào chất
Thể nguyên sinh(Protoplast) được thêm vào
một dung dịch có chứa DNA lạ, huyền phù
DNA- Protoplast được đưa vào một dòng
điện, sự tạo thành các vi khổng (small
spore) ở màng Protoplast cho phép DNA
xâm nhập vào tế bào.
Sau đó thể nguyên sinh vừa được chuyển
nạp gen sẽ tái sinh cho ra cây mới.
Sơ đồ chuyển gen bằng phương
pháp xung điện:
Qúa trình chuyển gen
Hiệu quả biến nạp khá cao .
Chuyển được cả các gen có kích thước lớn.
Có thể dùng một thể tích dịch tế bào nhỏ.
Chuẩn bị tế bào biến nạp đơn giản.
Tần số biến nạp với AND siêu xoắn vàADN
mạch vòng là giống nhau do đó không cần sử
dụng vector.
Hiệu suất biến nạp phân tử cho AND mạch vòng
rất cao đối với các plasmid có kích thước đến
50kb.
Ưu Điểm
Thiết bị biến nạp đắt tiền
Thời gian để tái sinh biến nạp kéo dài.
Có những thay đổi lớn không thể điều
chỉnh được trong biểu hiện của gen(hiệu
ứng vị trí).
Trong quá trình chuyển gen đòi hỏi người
chuyển phải khéo léo, chính xác tránh xảy
ra sai xót
Nhược điểm
•
Bằng kỹ thuật xung điện thì:
•
Chyển các gen mong muốn trong kỹ thuật
di truyền và nuôi trồng thuỷ sản
•
1992 Monila đã tạo ra được giống mía
chuyển gen
•
Tạo ra các vacine phòng bệnh hay các
loại vitamin.
Ứng dụng:
Tài liệu tham khảo:
1. Công nghệ sinh học thực
vật - Trần Thị Lệ
2. www.google.com.vn